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GV-CT-DNA植物基因组DNA提取试剂盒(CTAB法)

Genview


CAS号：

订货号

Cat #:GV-CT-DNA-50/ GV-CT-DNA-100
一、试剂盒组成、储存、稳定性

成分
 50 T
 100T 注意事项
Buffer GA1
 45ml 
 90ml （1）试剂中有巯基乙醇，有稍微
的刺激性气味属正常 。
（2）-20℃保存.
Buffer GA2
 50ml 
 100ml
Buffer GA3 
 2ml 
 4ml
Buffer GA4
 500μl
 1ml 
2ml 离心管
 50 个×2
 50 个×4
Handbook
 1 1

二、自备试剂
氯仿、异戊醇、乙醇、灭菌双蒸水
三、操作步骤
1． 取植物新鲜组织 50mg 或者干粉样品 30mg，加入液氮充分研磨成粉末状。样品量不应超过 50mg（干
粉样品 30mg），过多的样品使得裂解不充分，最终会导致基因组 DNA 提取量减少且纯度低。
2． 将粉末放到装有 800ul Buffer GA1 的 2ml 离心管，60℃预热 30min。
3． 其间混匀 2~3 次，取出样品于室温放置。（如需消化 RNA，可在此步骤加入 Buffer GA4 ，室温放置 10min）
4． 待样品冷却到室温，加入 800ul 氯仿：异戊醇（24：1）。
5． 振荡混匀，12000rpm 离心 15min。
6． 取上清到一新离心管中加入 1.5 倍体积 Buffer GA2（1ml 左右）。
7． 放置 20—30min，12000rpm 离心 15min，轻轻去掉上清。
8． 将沉淀晾干溶于 200ul TE-buffer 或灭菌双蒸水（溶解）。
9． 加入 400ul 无水乙醇，20ul Buffer GA3，-20℃沉淀 1h。
10．4℃12000rpm 离心 15min，轻轻去掉上清。
11．500ul 75%乙醇洗，12000rpm 离心 10min，轻轻去掉上清。
12．加入 30-50ul TE buffer 或灭菌双蒸水溶 DNA。
13．琼脂糖电泳检测（用 0.8%琼脂糖凝胶电泳检测，电泳缓冲液 0.5×TBE）。